Développement d'anticorps polyclonaux de poule

   

La poule (Gallina) est un modèle particulièrement intéressant pour l'obtention d'anticorps dirigés contre des protéines hautement conservées chez les mammifères. La société AGRO- BIO est engagée dans la recherche de solutions alternatives visant à Raffiner et Réduire l'expérimentation animale. Produire des anticorps dans le jaune d’œuf des poules est une alternative à l'expérimentation animale (Règle des 3 R, Remplacer, Réduire, Raffiner, développée par Russel et Burch).(Russel, W.M.S. & Burch, R.L. 1969. The Principles of Humane Experimental Technique, 238 pp. London: Methuen.)  Les poules sont d'excellentes productrices d'anticorps et leur réponse immunologique est comparable à celle des mammifères. « La quantité d'anticorps produite en un mois est 18 fois supérieure à celle produite dans le même laps de temps chez un lapin » (Gassman et al., 1990).

 

	IgY specifiques	IgY totales
Références :	P040102	P040101
Espèce :	Poulettes Isa Brown. AGRO-BIO conseille l'utilisation de 2 poules par protocole pour éviter la variabilité et la susceptibilité individuelle des animaux. Cette poule pondeuse pond en moyenne 280 œufs chaque année.
Antigènes :	Haptènes, peptides, protéines, bactéries, virus ou tout autre organisme inactivé ou non toxique.
Quantités d’antigènes :	Afin d’obtenir de bons titres d’anticorps, AGRO-BIO utilise de 100 à 250µg par injection et par animal. Les doses varient en fonction de la nature de l’antigène (protéine ou peptide).
Injections :	Les injections sont réalisées par voie intra-musculaire en adjuvant complet de Freund pour la primo-injection et en adjuvant incomplet de Freund pour les rappels.

Les IgY présentent un certain nombre d’avantages par rapport aux IgG des mammifères :

 

§          analogues naturels des IgG fragmentées F(ab’)2

§          Pas de fixation sur le récepteur Fc des mammifères

§          Pas de fixation sur les protéines A et G

§          Pas d'activation des protéines du complément 

Voir la fiche technique NT002 : IgY spécifiques

Voir la fiche technique NT003 : IgY totales

 

AGRO-BIO vous propose 2 protocoles d’immunisation distincts en fonction de vos besoins :

• Poule 1: Production d'IgY spécifiques
  • 70 jours de protocole d’immunisation pendant lesquels 2 poules sont immunisées et les œufs collectés.
  • Extraction des IgY totales à partir de 6 œufs pré-immuns et 25 œufs hyper-immuns par poule.
  • Purification d’affinité permettant l’obtention de 15 à 20 mg d’IgY spécifiques.
• Poule 2: Production des IgY totales:
  • Protocole très rapide sur une durée de 35 jours.
  • Grâce à une méthode d’extraction très performante développée par AGRO-BIO, vous disposez en moyenne de 600 mg d’IgY totales, soit 5 à 8 mg d'IgY spécifiques.  

Espèce	Nombre minimal d'animaux par protocole	Durée du protocole (en jours)	Nombre d'injections par animal	Quantité d'antigène par injection	Nombre de prélèvements par animal	Quantité finale
Poule 1	2	70	4	100-250 µg	/	15-20 mg IgY spécifiques
Poule 2	1	35	3	100-250 µg	/	5-8 mg IgY spécifiques
Lapin	1	77	5	150-300 µg	3	60-75 ml
Chèvre	1	77	5	150µg-1 mg	2	280-300 ml
Souris	5	35	3	20-50 µg	1	300-500 µl
Rat	3	35	3	100-300 µg	1	2,7-3 ml
Cobaye	3	49	4	100-250 µg	1	6-9 ml

 

Bien que présentant une grande hétérogénéité, les anticorps polyclonaux sont très spécifiques de l'antigène et très sensibles en raison du nombre d’épitopes différents qu'ils reconnaissent. Agro-Bio vous propose de télécharger le cahier des charges de votre développement de manière à définir les propriétés de votre antigène et les objectifs à remplir.

 

L'animalerie d’AGRO-BIO est agréée par la préfecture de Loir et Cher pour la réalisation d'expérimentation sur les animaux vertébrés.

Numéro d'agrément : B 41-285-4.

 

 

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