Développement d'anticorps polyclonaux de cobaye

 

 

Les petits rongeurs tel que le cobaye (Cavia porcellus) représentent une espèce de choix lorsque de faibles quantités d'antigène sont disponibles et lorsque la production de faibles volumes d'anticorps suffisent à l'utilisation prévue.

 

 

Les cobayes sont moins fréquemment immunisés pour la production d'anticorps que dans le passé. Ils sont phylogénétiquement plus éloignés de la souris que le rat et peuvent être utilisés pour produire des anticorps anti-souris lorsque ceux-ci ne peuvent pas être obtenus chez le rat.

 

  

Référence :

 

A03510

Ce protocole est réalisé par groupe de 3 cobayes minimum de façon à pallier la variabilité génétique de chaque animal.

 

Espèce :

 

Cobayes Hartley

D'autres modèles sont disponibles sur demande.

 

Antigènes :

 

Haptènes, peptides, protéines, bactéries, virus ou tout autre organisme inactivé ou non toxique dont l’antigénicité et l’immunogénicité ont été démontrées.

 

Quantités d’antigènes :

 

Afin d'obtenir de bons titres d'anticorps, Agro-bio utilise 150 µg d'antigène en moyenne par injection et par animal.

 

Injections :

 

La première injection est réalisée par voie intradermique en adjuvant complet de Freund et les rappels par voie sous cutanée en adjuvant incomplet de Freund.

 

 Espèce

 Nombre minimal d'animaux par protocole

 Durée du protocole (en jours)

 Nombre d'injections par animal

 Quantité d'antigène par injection

 Nombre de prélèvements par animal

 Quantité finale

 Poule 1

 2

 70

 4

 100-250 µg

 /

 15-20 mg IgY spécifiques

 Poule 2

1

 35

 3

 100-250 µg

 /

5-8 mg IgY spécifiques

 Lapin

1

 77

 5

 150-300 µg

 3

 60-75 ml

 Chèvre

1

 77

 5

 150µg-1 mg

 2

 280-300 ml

 Souris

 5

 35

 3

 20-50 µg

 1

 300-500 µl

 Rat

 3

 35

 3

 100-300 µg

 1

 2,7-3 ml

 Cobaye

 3

 49

 4

 100-250 µg

 1

 6-9 ml

  Voir la fiche technique NT0013

Ø      Programme d’immunisation

Les cobayes sont maintenus en ambiance contrôlée, dans des conditions standardisées et en accord avec la réglementation en vigueur.

 

 

Jour

0

14

28

42

49

Injection

1ère

2ème

3ème

4ème

 

Volume de sérum

Pré-immun(1)

2 ml

 

 

 

4 ml

(1) Tester les sérums en pré-immun permet de déterminer si les animaux possèdent naturellement des anticorps pouvant reconnaître de manière non spécifique l'antigène d'intérêt.

 

 

A la fin de ce protocole, vous disposez de 10 jours à compter du jour de réception de votre dernier prélèvement (J49) pour nous informer de votre décision de poursuivre ou non votre protocole. Passé ce délai et en l'absence de réponse de votre part, nous sommes contraints de sacrifier vos animaux.

 

Agro-bio est à votre écoute pour vous fournir les meilleurs conseils durant toute la durée de votre protocole et pour l'utilisation ultérieure de vos anticorps.

  

Bien que présentant une grande hétérogénéité, les anticorps polyclonaux sont très spécifiques de l'antigène et très sensibles en raison du nombre d’épitopes différents qu'ils reconnaissent. Agro-Bio vous propose de télécharger le cahier des charges de votre développement de manière à définir les propriétés de votre antigène et les objectifs à remplir.

L'animalerie d’AGRO-BIO est agréée par la préfecture de Loir et Cher pour la réalisation d'expérimentation sur les animaux vertébrés.

Numéro d'agrément : B 41-285-4.

 

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