Développement d'un anticorps monoclonal de rat

Intérêt des anticorps monoclonaux de rat : Le répertoire "Anticorps de rat" est différent du répertoire "Anticorps de souris". Cette nouvelle capacité d'Agro-Bio permet ainsi une approche plus complète de l'identification de nouvelles protéines, Un répertoire "Anticorps de rat" permet son exploitation sur des modèles "souris", ce qui n'est pas possible avec les anticorps monoclonaux de souris, Absence de contamination virale sur les hybridomes de rat.   Le succès d’un Programme de Développement d’hybridomes repose sur la qualité de la préparation du projet et la communication établie avec le client.

Voir la fiche technique NT007

Un programme standard de développement d’hybridomes s’articule comme suit (durée minimale : 5 mois) : 

Phase d'initialisation du projet	Renseigner le formulaire du cahier des charges pour le développement de votre anticorps monoclonal. AGRO-BIO évalue en retour la faisabilité de votre programme. Sur demande, une bibliographie portant sur votre antigène ou l'anticorps développé peut être réalisée. Des coûts supplémentaires vous seront alors facturés.
Phase I: Immunisation (9 semaines)	- Notre protocole standard sur 3 rats comprend: Phase I : Immunisation des animaux selon un protocole en 63 jours comprenant 4 injections et 2 prélèvements de contrôle. Développement d'une méthode ELISA  spécifiquement développée pour suivre la réponse immunitaire des animaux de votre protocole. Suivi de la réponse immunitaire des rats immunisés afin de déterminer le(s) rat(s) présentant le meilleur titre sérique. Choix de la souris ou du rat pour la réalisation de l'étape de fusion.
Phase II : Fusion (2 semaines)	Les splénocytes provenant du meilleur rat sont fusionnés avec des cellules de myélome. Les cellules ainsi fusionnées sont placées sur des plaques 96 puits. Les puits dans lesquels un seul clone a poussé sont identifiés 6 jours après la fusion.
Phase III: Criblage primaire (4-5 semaines)	Les surnageants de culture provenant des puits identifiés sont testés en ELISA via la méthode précédemment développée. Les hybridomes positifs sont ensuite passés en plaques 24 puits de manière à subir une deuxième série de criblage et sélectionner les meilleurs hybridomes suivant leur spécificité vis à vis de l'antigène. Les meilleurs hybridomes sont sélectionnés et une banque de cryotubes est réalisée.
Phase IV: Clonage (2 semaines)	En collaboration avec le client, le meilleur hybridome retenu est cloné par des dilutions successives.
Phase V: Criblage Secondaire (3-4 semaines)	Les clones sont répartis en plaques 96 puits et un criblage secondaire est réalisé en ELISA . Le meilleur clone positif sera sélectionné et une banque de 10 cryotubes est réalisée.

La qualification des anticorps produits pour une application particulière peut-être réalisée même si elle n'est pas incluse dans la prestation standard.

Agro-Bio peut vous faire parvenir, sur demande, 2 ml de surnageant de manière à tester les hybridomes selon vos propres méthodes et au sein de votre laboratoire.

 

Agro-Bio vous propose de télécharger le cahier des charges de votre développement.

L'animalerie d’AGRO-BIO est agréée par la préfecture de Loir et Cher pour la réalisation d'expérimentation sur les animaux vertébrés.

Numéro d'agrément : B 41-285-4.

 

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